图1: 不同级别Cas9蛋白在原代T细胞的TRAC基因敲除实验的基因敲除效率分析 星空官网，分别使用RUO级别和GMP级别的野生型和突变型Cas9蛋白，搭配星空体彩app官方合成的sgRNA ，通过电转方式对人原代T细胞进行TRAC基因敲除实验，该结果表明GMP级别的Cas9蛋白在T细胞的TRAC位点敲除实验中，与RUO级别Cas0蛋白产品拥有高度一致的基因敲除效率，敲除效率均为95%以上，随着开发项目逐渐向临床阶段推进，可以较快的从RUO级别Cas9蛋白产品转换到GMP级别Cas9蛋白产品。
本次实验体系： 参数 数值 Cas9蛋白用量 ~4 μg Cas9: sgRNA (摩尔比) 1:2 RNP投入量 ~25 pmol 细胞数 1，0 × 106 反应体积 20 μl 星空平台 - GMP级别Cas9蛋白在不同规模电转体系中都有较高基因编辑效率 图2：GMP级别Cas9蛋白在不同规模电转体系中的基因编辑效率分析。使用GMP级别的野生型和突变型Cas9蛋白，搭配星空体彩app官方合成的sgRNA，通过电转方式分别在20 μl和100 μl反应体系中对人原代T细胞进行TRAC基因敲除实验。该结果表明GMP级别的Cas9蛋白在两个反应体系中拥有高度一致的基因敲除效率，敲除效率均为95%以上。 星空体育登录。
本次实验体系：
| 参数 | 数值 | |
|---|---|---|
| 转染体系 | 20 μl | 100 μl |
| Cas9 蛋白用量 | ~4 μg | ~20 μg |
| Cas9: sgRNA (摩尔比) | 1:2 | 1:2 |
| RNP 投入量 | ~25 pmol | ~125 pmol |
| 细胞数 | 1.0 × 106 | 5.0 × 106 |
图3：GMP级别突变型Cas9蛋白在原代T细胞基因编辑效率和脱靶率分析，使用星空体彩app官方GMP级别的野生型和突变型Cas9蛋白及竞品野生型Cas9蛋白，搭配星空体彩app官方合成的sgRNA，通过电转方式在人原代T细胞系中进行TRAC及GM-CSF基因敲除实验 星空平台，该结果表明星空体彩app官方提供的GMP级别突变型Cas9与野生型Cas9蛋白在原代T细胞不同靶位点上均有相似的基因敲除效率，并表现出比野生型更低的脱靶效率。
本次实验体系：
| 参数 | 数值 | |
|---|---|---|
| 靶点 | TRAC | GM-CSF |
| Cas9蛋白用量 | ~1.2 μg | ~4 μg |
| Cas9: sgRNA (摩尔比) | 1:3 | 1:2 |
| RNP投入量 | ~7.5 pmol | ~25 pmol |
| 细胞数 | 2.0 × 105 | 1.0 × 106 |
| 反应体积 | 10 μl | 20 μl |
图4：GMP级别Cas9在原代T细胞中TRAC基因中敲入GFP基因的效率分析，使用GMP级别的野生型和突变型Cas9蛋白，搭配星空体彩app官方合成的sgRNA，通过电转方式在人原代T细胞TRAC基因位点进行原位敲入实验，该结果表明GMP级别的Cas9蛋白在原代T细胞中有高基因敲入效率 星空体育网页版， 。
本次实验体系：
| 参数 | 数值 |
|---|---|
| Cas9蛋白用量 | ~4 μg |
| Cas9: sgRNA (摩尔比) | 1:2 |
| RNP投入量 | ~25 pmol |
| 细胞数 | 1.0 × 106 |
| HDR Donor | 2 μg |
| 反应体积 | 20 μl |
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GMP级别Cas9蛋白申请试用
